Критерием, по которому определяется чувствительность определенной бактерии к воздействию антибиотиков, является его минимальное количество, при котором прекращается рост микроорганизма в опытных условиях. Для проведения исследований используется чистая культура, которая высеивается еще до начала антибиотикотерапии. Для проведения опытов используют метод диффузии в агар, применяя диски стандартного типа или метод серийных разведений в плотных средах.
Получить КП на анализаторы чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам
Метод бумажных дисков
Основная емкость для засевания – чаша Петри, в которую бактерии высаживаются газоном. Питательной средой для развития является агар. На одинаковом друг от друга расстоянии размещают бумажные диски с определенными дозами антибиотиков. Инкубация производится при температуре +37 градусов по Цельсию. В зависимости от диаметра зон растительности определяют уровень чувствительности.
Чтобы получить максимально достоверные результаты следует использовать стандартные диски и эталонные штаммы бактерий. Такой метод не всегда дает достоверный результат.
Метод серийных разведений
Исследование позволяет определить минимальную концентрацию антибиотиков. Для определения чувствительности используется раствор с определенной концентрацией антибиотиков в буферном растворе или растворителе. Все последующие разведения также готовятся на его основе. К каждому последующему составу добавляется 0,1 мл исследуемой суспензии, в которой содержится 106-107 клеток бактерий на 1 мл. Инкубацию проводят при температуре 37°С.
| Номер пробирки | Разведение антибиотика | Концентрация антибиотика, мкг/мл | Исследуемая культура, мл | Рост бактерий, помутнение среды |
| 1 | 1:100 | 100 | 0,1 | - |
| 2 | 1:200 | 50 | 0,1 | - |
| 3 | 1:400 | 25 | 0,1 | - |
| 4 | 1:800 | 12,5 | 0,1 | - |
| 5 | 1:1600 | 6,25 | 0,1 | + |
| 6 | 1:3200 | 3,12 | 0,1 | + |
| 7 | 1 мл бульона без антибиотика | 1 мл бульона без антибиотика | 0,1 | + (контроль) |
Данную таблицу используют для определения результатов по уровню чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. В ней указаны пограничные значения диаметров для разных типов штаммов (устойчивых, умеренно устойчивых, чувствительных).
У чувствительных штаммов рост подавляется обычными дозами антибиотиков. У умеренно устойчивых рост подавляется максимальными дозами антибиотиков. У устойчивых штаммов рост и развитие не прекращаются даже при использовании максимальных дозировок.
Применяемые препараты бактериофагов, указанные в таблице, это фильтраты бульонной культуры, представляющие собой прозрачные жидкости желтого цвета. Фаги выпускаются в таблетированной форме в кислотоустойчивой оболочке. Их удобно использовать и хранить. Одна таблетка соответствует 20-25 граммам жидкого фага.
После применения бактериофаги остаются в организме около 5-7 дней. Обычно их прием проходит без реакций или осложнений. В зависимости от формы различают средства для орошения, полосканий, примочек, тампонов, инъекций. Некоторые фаги могут вводиться в брюшную, плевральную, суставную полости или мочевой пузырь.
Рассчитать стоимость анализаторов чувствительности микроорганизмов
С помощью фагов можно определить род и вид бактерий, которые выделяются при проведении бактериологического исследования. Бактериофаги выпускаются в жидкой и сухой формах в апмулах, перед применением разводятся.
Для эффективного проведения исследований могут использоваться специальные устройства – анализаторы чувствительности микроорганизмов, например модели Юнона® ХК-II и Юнона® Formula. Они используют в работе тубидиметрический и колориметрический методы анализа и позволяют оперативно определить чувствительность микроорганизмов к антибиотикам. Благодаря удобному интерфейсу и высокой скорости работы приборы позволяют быстро получать максимально точные результаты в микробиологических лабораториях.
